Экспериментально-клиническое обоснование целесообразности использования спрея BIOZILAR в терапии острого риносинусита

Рис. 1. Слизистая оболочка полости носа крысы основной группы. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×100

Рис. 2. Слизистая оболочка перегородки носа крысы группы сравнения. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×200

Таблица 1. Субъективная оценка носового дыхания в группе 1 в период наблюдения, n = 20

Таблица 2. Субъективная оценка носового дыхания в группе 2 в период наблюдения, n = 20

Рис. 3. Средняя частота применения деконгестантов в группах 1 и 2 в период наблюдения

Таблица 3. Показатели передней активной риноманометрии в группе 1 в период наблюдения, n = 20

Таблица 4. Показатели передней активной риноманометрии в группе 2 в период наблюдения, n = 20

Таблица 5. Число пациентов с выявленной микрофлорой полости носа на первом визите в группе 1, n = 20

Таблица 6. Число пациентов с выявленной микрофлорой полости носа на втором визите в группе 1, n = 20

Таблица 7. Число пациентов с выявленной микрофлорой полости носа на первом визите в группе 2, n = 20

Таблица 8. Число пациентов с выявленной микрофлорой полости носа на втором визите в группе 2, n = 20

Рис. 4. Число пациентов с выявленной микрофлорой полости носа в группах 1 и 2: А – на первом визите, до начала терапии; Б – на третьем визите, после окончания терапии

Таблица 9. Интерпретация результатов применения частиц-метчиков для изучения мукоцилиарного клиренса

Таблица 10. Время мукоцилиарного транспорта до и после применения спрея BIOZILAR (группа 1)

Таблица 11. Время мукоцилиарного транспорта до и после применения протеината серебра (группа 2)

Рис. 5. Время мукоцилиарного транспорта до и после лечения в группах 1 и 2, n = 40

Введение

Медицина – наука разноплановая. Но в настоящее время на все сферы медицины распространилась «эпидемия» антибиотикорезистентности. По оценке Всемирной организации здравоохранения, из-за неконтролируемого использования антибактериальных препаратов к 2050 г. ожидаемая смертность от антибиотикорезистентных бактерий составит до 10 млн человек в год [1]. Сложившаяся ситуация привела к поиску альтернативных препаратов для борьбы с бактериальной инфекцией.

Еще в древние времена люди знали антибактериальные свойства серебра. История сохранила множество примеров его применения, основанного на бактерицидном действии [2, 3]. Массовое использование серебра связано с изобретением его коллоидной формы в конце XIX века [4]. Препарат стали применять повсеместно против разных заболеваний – от простуды и сифилиса до психических расстройств [5]. В начале XX века из-за появления первых антибиотиков потребность в препаратах серебра резко снизилась, их продолжали использовать только для лечения ожоговых ран и профилактики неонатального конъюнктивита. В связи с ростом антибиотикорезистентности патогенной микрофлоры поиск путей применения серебра был продолжен. В оториноларингологии борьба с вирусным и бактериальным воспалением стала острой проблемой, учитывая подверженность лор-органов воздействию инфекционных агентов [6, 7]. Слизистая оболочка полости носа и околоносовых пазух обеспечивает организм человека очищенным воздухом, при этом аккумулируя весь спектр патогенных микроорганизмов, аллергенов и поллютантов. Особую важность в последнее время приобретает профилактика присоединения бактериального воспаления на фоне вирусного поражения [8, 9].

В конце XX века эффективность серебра как антимикробного средства была клинически доказана. Благодаря синтезу наночастиц серебра резко расширился спектр применения препаратов на его основе и повысился их противовоспалительный эффект. Спрей BIOZILAR состоит из наночастиц серебра размером 3–4 нм, которые способны находиться во взвешенном состоянии бесконечно долго. Концентрат стабилен в физрастворе, химически чист. В его составе – деионизированная вода и серебро. Благодаря уникально малому размеру частиц серебра этот препарат значительно эффективнее ранее известных. Спрей прошел ряд доклинических и клинических исследований. Однако в оториноларингологии его не иссле­довали.

На клинических базах кафедры оториноларингологии Российского университета медицины было проведено двухэтапное экспериментально-клиническое исследование, одобренное этическим комитетом.

Целью первого этапа исследования была оценка эффективности исследуемого средства (раствора наночастиц серебра) – спрея BIOZILAR – в лечении схожего с острым воспалительным ринитом воспаления и восстановлении эпителия слизистой оболочки носа лабораторных животных (крыс).

Экспериментальное исследование эффективности использования спрея BIOZILAR на лабораторных животных

Материал и методы

На первом этапе было проведено экспериментальное исследование действия спрея BIOZILAR на шести крысах-самцах массой от 319 до 360 г, полученных из вивария Российского университета медицины. Животные размещались в условиях вивария со средней продолжительностью светового дня, составляющей 12 часов, средней температурой воздуха 18–23 °C и относительной влажностью воздуха 40–60% в соответствии с ГОСТ 33216-2014 «Межгосударственный стандарт. Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными». Наблюдение за животными осуществлялось в течение шести дней, у животных был неограниченный доступ к воде и пище. На шестой день исследования была выполнена эвтаназия с применением комбинированного препарата на основе тилетамина и золазепама. Всем крысам в первый день для провокации острого ринита интраназально капельно с помощью лабораторного дозатора вводили нейтральный забуференный 10%-ный формалин в дозе 20 мкл. В результате воздействия формалина на слизистую оболочку полости носа у крыс происходило нарушение целостности поверхностных слоев слизистой оболочки, обусловленное сильным раздражением, соответствующее явлениям при остром воспалительном рините. В качестве терапии в основной группе вводили раствор наночастиц серебра размером 3–4 нм (спрей BIOZILAR) четыре раза в день в дозе 10 мкл. В контрольной группе вводили изотонический стерильный солевой раствор четыре раза в день в дозе 10 мкл. Лечение проводили в течение пяти дней. На шестой день был выполнен забор образцов слизистой оболочки полости носа.

Патологоанатомическое исследование производили с помощью метода световой микроскопии, которому предшествовала стандартная подготовка биоптатов (фиксация в нейтральном формалине, гистологическая проводка, заливка в парафин, окрашивание срезов гематоксилином и эозином).

Результаты

При гистологическом исследовании в основной группе были обнаружены следующие изменения:

• обильная воспалительная инфильтрация эпителия и собственной пластинки слизистой оболочки лимфоцитами;
• выход лимфоцитов на поверхность эпителия слизистой оболочки;
• повышенное содержание бокаловидных клеток в эпителии слизистой оболочки; гиперпродукция слизи, содержащей лимфоциты (рис. 1А).

На апикальной поверхности эпителиоцитов слизистой оболочки четко различимы реснички (рис. 1Б).

При гистологическом исследовании в группе конт­роля были обнаружены следующие изменения:

• разрыхление и некроз эпителия слизистой оболочки полости носа;
• расширение просвета кровеносных и лимфатических сосудов, слабый отек в рыхлой волокнистой соединительной ткани – компонента собственной пластинки слизистой оболочки;
• скудная инфильтрация эпителия и собственной пластинки слизистой оболочки лимфоцитами (рис. 2А);
• отсутствие четко дифференцируемых ресничек на апикальной поверхности эпителиоцитов (рис. 2Б).

Выводы

Таким образом, можно предположить, что исследуемое средство – раствор наночастиц серебра, спрей BIOZILAR – продемонстрировало модифицирующий эффект, который способствует более быстрому прекращению воспалительного процесса и, соответственно, восстановлению слизистой оболочки полости носа. В частности, раствор серебра положительно воздействует на слизистую оболочку носа, подверг­шуюся химическому воздействию, способствует более быстрому восстановлению эпителия, что может привести к ускоренному клиническому выздоровлению.

Целью второго этапа исследования была оценка клинической эффективности, переносимости и безопасности спрея BIOZILAR с размером частиц се­ребра 3–4 нм в лечении острого инфекционного риносинусита на фоне острой респираторной вирусной инфекции у взрослых.

Клиническое исследование эффективности использования спрея BIOZILAR у пациентов с острым инфекционным риносинуситом

Материал и методы

На втором этапе проведено простое сравнительное наблюдательное клиническое исследование с формированием двух групп по 20 больных с острым инфекционным риносинуситом на фоне острой респираторной вирусной инфекции. В основной группе (группа 1), пациенты которой перед началом лечения заполнили форму информированного добровольного согласия, применялся спрей для полости носа и рта BIOZILAR с размером частиц серебра 3–4 нм по два впрыска в обе половины полости носа 4–5 раз в день в течение семи дней. В группе сравнения (группа 2) использовали протеинат серебра (2%-ный раствор) ежедневно по две капли в каждую половину носа три раза в день в течение семи дней. При необходимости было разрешено использовать местно сосудосуживающие средства, жаропонижающие препараты.

Результаты

Был проведен анализ субъективной оценки носового дыхания по визуально-аналоговой шкале (ВАШ) в процессе лечения в обеих группах, где результаты от 0 до 1 балла интерпретировались как свободное носовое дыхание, от 2 до 4 – как легкая назальная обструкция, от 5 до 7 – как умеренная назальная обструкция, от 8 до 10 баллов – как тяжелая назальная обструкция (табл. 1, 2).

С учетом динамики улучшения носового дыхания были проанализированы частота и длительность применения деконгестантов (рис. 3). На первом визите было выяснено, что все пациенты использовали деконгестанты от двух до шести раз в день. В первой группе к третьему дню восемь пациентов отказались от сосудосуживающих препаратов полностью, шесть пациентов применяли их 1–2 раза в день и шесть – до 3–4 раз в день. К седьмым суткам двое больных применяли деконгестанты 1–2 раза в день. Во второй группе к третьему дню шесть пациентов отказались от сосудосуживающих препаратов полностью, семь пациентов применяли их 1–2 раза в день и семь – до 3–4 раз в день. К седьмым суткам трое больных применяли деконгестанты 1–2 раза в день.

Для определения объективных показателей носового дыхания использовали переднюю активную риноманометрию (ПАРМ). Был выполнен анализ суммарного носового потока (СНП), а также суммарного носового сопротивления (СНС) на вдохе и выдохе при давлении 150 Па в первой и второй группе (табл. 3, 4).

В обеих группах, исходя из полученных данных при оценке СНП и СНС на вдохе и выдохе при давлении 150 Па, ко второму визиту была отмечена положительная динамика, которая сохранялась до конца терапии (день 7 ± 1).

Также был проведен забор биоматериала со слизистой оболочки полости носа для определения микрофлоры перед началом терапии и на 7-й день лечения.

На первом визите в первой группе получены следующие данные микробиологического исследования: Streptococcus pneumoniae обнаружены у восьми пациентов, Staphylococcus aureus – у четырех, Haemophilus influenzae – также у четырех. Не было выявлено роста патогенной микрофлоры в четырех случаях (табл. 5).

На втором визите был выполнен повторный забор отделяемого из полости носа. Получены следующие данные микробиологического исследования: H. influenzae обнаружены у двух пациентов, Str. pneumoniae – у трех, S. aureus – у одного. При этом у всех пациентов патогенные возбудители высеяны в этиологически незначимых количествах. Не было выявлено роста патогенной микрофлоры в 14 случаях (табл. 6).

На первом визите во второй группе получены следующие данные микробиологического исследования: Streptococcus pneumoniae обнаружены у шести человек, Staphylococcus aureus – у трех, Haemophilus influenzae – у шести. Не было выявлено роста патогенной микрофлоры в пяти случаях (табл. 7).

На втором визите во второй группе был выполнен повторный забор отделяемого из полости носа. Получены следующие данные микробиологического исследования: H. influenzae обнаружен у четырех человек, Str. pneumoniae – у трех, S. aureus – у одного. При этом у всех пациентов патогенные возбудители высеялись в этиологически незначимых количествах. Не было выявлено роста патогенной микрофлоры в 12 случаях (табл. 8).

Сравнительные характеристики результатов микробиологического исследования на первом и третьем визитах в группах 1 и 2 отображены на рис. 4.

Также всем пациентам было проведено исследование мукоцилиарного клиренса в первый и в третий визит. В качестве частиц-метчиков выбран активированный уголь, частицы которого помещали на передний край нижней носовой раковины под контролем эндоскопа. Затем каждую минуту проверяли динамику продвижения частиц-метчиков в полости носа, а далее – по задней стенке глотки с помощью эндоскопа. Для оценки полученных результатов руководствовались данными, указанными в Национальном руководстве под редакцией М.Р. Богомильского (табл. 9). Результаты замера времени мукоцилиарного транспорта (МЦТ) приведены в табл. 10 и 11 и на рис. 5.

На день 14 ± 2 проводился телефонный контакт для контроля результатов лечения: не было ли рецидивов заболевания или повторного инфицирования пациентов.

В ходе исследования нежелательных явлений не отмечено. В первой группе три пациента обратили внимание на ощущение сухости и дискомфорта сразу после применения препарата, которое проходило самостоятельно в течение 5–10 минут. У двух пациентов было зафиксировано ухудшение состояния на 6–7-й день лечения: у одного диагностирован острый левосторонний бактериальный риносинусит средней степени тяжести, у другого – острый двусторонний бактериальный риносинусит легкого течения. В обоих случаях проведены курсы системной антибактериальной терапии с положительным эффектом.

Во второй группе 13 пациентов обратили внимание на ощущение сухости и дискомфорта сразу после применения протеината серебра, которое проходило самостоятельно в течение 5–10 минут. У трех пациентов было отмечено ухудшение состояния на 6–7-й день лечения: у двух больных диагностирован острый правосторонний бактериальный риносинусит легкой и средней степени тяжести, у одного – острый двусторонний бактериальный риносинусит легкого течения. Во всех трех случаях проведены курсы системной антибактериальной терапии с положительным эффектом.

В первой группе все пациенты полностью соблюдали кратность и длительность применения препарата. В контрольной группе шесть пациентов досрочно завершили курс лечения из-за дискомфорта во время применения средства.

Выводы

Согласно данным сравнительного наблюдательного исследования, проведенного на клинических базах кафедры оториноларингологии Российского университета медицины, подтверждена эффективность спрея BIOZILAR в лечении пациентов с острым инфекционным риносинуситом на фоне острой респираторной вирусной инфекции. Эффективность препарата была сопоставима с эффективностью протеината серебра.

На фоне терапии уже на третий день отмечено восстановление носового дыхания за счет купирования воспалительных проявлений заболевания и выраженное улучшение самочувствия пациентов как основной группы, так и группы сравнения. Эти результаты подтверждены объективным методом обследования (ПАРМ). Ко второму визиту (день 3 ± 1) отмечен рост всех показателей носового дыхания, которые к третьему визиту (день 7 ± 1) достигли нормальных значений у большинства пациентов.

Быстрое улучшение носового дыхания при использовании препаратов серебра позволяет уменьшить или отменить использование сосудосуживающих средств и снизить нагрузку деконгестантами на ранних этапах лечения.

Анализ микрофлоры полости носа показал, что спрей BIOZILAR эффективно подавляет рост патогенной микрофлоры, как и протеинат серебра.

Проведено исследование мукоцилиарного клиренса методом применения частиц-метчиков. В день начала исследования в связи с наличием воспалительных изменений показатели скорости МЦТ у большинства пациентов в обеих группах соответствовали нарушениям I–II степени. К заключительному визиту у всех пациентов данные показатели пришли в норму, что говорит о восстановлении слизистой оболочки полости носа за счет купирования воспаления и отсутствия негативного влияния средства.

В ходе исследования нежелательных явлений не было. Три пациента отметили ощущение сухости и дискомфорта сразу после применения спрея BIOZILAR, которое проходило самостоятельно в течение 5–10 минут, и 13 пациентов отметили такие же симптомы после применения протеината серебра.

У двух пациентов в первой группе и у трех во второй группе отмечено ухудшение состояния и необходимость назначения антибактериальной терапии на 6–7-й день лечения. Во всех случаях проведены курсы системной антибактериальной терапии с положительным эффектом.

Заключение

Таким образом, спрей BIOZILAR в эксперименте и клинической практике оказался эффективным средством в лечении острого инфекционного риносинусита на фоне острой респираторной вирусной инфекции. При относительно равной микробиологической активности исследуемых средств у пациентов в группе, получавшей BIOZILAR, приверженность к терапии была выше благодаря более комфортному применению, вследствие чего клиническая эффективность спрея также оказалась несколько выше протеината серебра.