В настоящее время 50–70% взрослого населения планеты инфицированы вирусом папилломы человека (ВПЧ), но только у 1–2% из них инфекция сопровождается клиническими проявлениями. Остроконечные кондиломы чаще встречаются у пациентов в возрасте 16–25 лет1.
Руководитель гинекологического отделения восстановительного лечения Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии (НЦАГиП) им. академика В.И. Кулакова, д.м.н., профессор кафедры акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. Сеченова Инна Анатольевна АПОЛИХИНА доложила результаты исследования эффективности методов ФД и ФДТ в лечении остроконечных кондилом, проведенного НЦАГиП совместно с государственным научным центром «Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей» (ГНЦ «НИОПИК») и Институтом общей физики им. А.М. Прохорова. Целью исследования стало повышение эффективности диагностики и лечения остроконечных кондилом вульвы с помощью ФД и ФДТ с применением отечественного просенсибилизатора Аласенс (5-аминолевулиновая кислота, 5-АЛК), синтезированного ГНЦ «НИОПИК».
В задачи исследования входили:
- изучение кинетики накопления и выведения 5-АЛК-индуцированного фотосенсибилизатора протопорфирина IХ (ПП-IХ) в нормальных тканях вульвы и остроконечных кондиломах после приема 5-АЛК в дозе 25 мг/кг и местного применения 20%-ной мази 5-АЛК;
- оценка возможности ФД в выявлении субклинических очагов папилломавирусной инфекции (ПВИ) с использованием 5-АЛК;
- сравнительная оценка результатов ФДТ при приеме, местном применении 5-АЛК и химической коагуляции остроконечных кондилом вульвы Солкодермом;
- выявление побочных эффектов ФД и ФТД после приема 5-АЛК и местного применения 20%-ной мази 5-АЛК.
В исследовании участвовали 85 пациенток с остроконечными кондиломами вульвы. Пациентки были разделены на 3 группы: больным 1-й группы (n = 37) назначали 5-АЛК внутрь в дозе 25 мг/кг, больным 2-й группы (n = 30) – местное применение 20%-ной мази 5-АЛК, больным 3-й группы (n = 18) – химическую коагуляцию Солкодермом2.
Для изучения кинетики накопления и выведения из ткани 5-АЛК-индуцированного ПП-IХ применяли методику локальной флуоресцентной спектроскопии. Данные исследования кинетики накопления ПП-IХ после приема 5-АЛК и местного применения 20%-ной мази 5-АЛК показали, что оптимальный временной интервал для ФД и ФДТ составляет от 3 до 7 часов и от 2 до 6 часов соответственно.
Для флуоресцентной визуализации тканей вульвы с целью выявления скрытых очагов остроконечных кондилом использовали светодиодный осветитель ЛФС (прибор для локальной флуоресцентной спектроскопии) с длиной волны 400 нм, что позволило диагностировать субклинические очаги ПВИ в обеих группах.
Эффективность ФДТ при приеме Аласенса (5-АЛК), местном применении мази Аласенс и лечении препаратом Солкодерм оказалась сопоставимой (73, 70 и 77% соответственно). Между тем уровень рецидивов после ФДТ был статистически значимо ниже (р < 0,05), чем после традиционного метода лечения (рис. 1).
Данные этой междисциплинарной исследовательской работы, проведенной физиками-клиницистами, акушерами-гинекологами и химиками, продемонстрировали высокую эффективность ФД с просенсибилизатором Аласенс как метода диагностики остроконечных кондилом вульвы, позволяющего выявлять скрытые очаги ПВИ. ФДТ остроконечных кондилом с использованием Аласенса также является альтернативным методом лечения с доказанной в ходе исследования эффективностью и высоким профилем безопасности.
Профессор И.А. Аполихина сообщила результаты собственного исследования, в котором были изучены возможности ФД и ФДТ с использованием 5%-ного геля Аласенс для лечения вульвовагинального кандидоза (ВВК). 76 пациенток в возрасте от 25 до 55 лет были распределены на 3 группы. В 1-ю группу вошли 36 больных ВВК, во 2-ю – 25 больных бактериальным вагинозом (БВ), в 3-ю – 15 больных неспецифическим вагинитом (НВ). Дизайном исследования было предусмотрено изучение кинетики накопления ПП-IХ во влагалище и вульве методом ЛФС, флуоресцентная визуализация, ФД и ФДТ.
Обследование включало сбор анамнеза, оценку жалоб и выраженности симптомов заболевания, пациенткам также провели диагностику методом ПЦР (полимеразная цепная реакция), микроскопию мазков, посев на питательные среды. Для оценки эффективности проводимой терапии им назначались 4 консультации с промежутком в 2–3 дня и контрольный визит через 3–4 недели после ФДТ. Применялась следующая методика проведения ФДТ:
1) накопление фотосенсибилизатора в тканях вульвы, для чего использовался 5%-ный гель Аласенс;
2) через 2 часа – облучение вульвы и влагалища источником лазерного излучения с длиной волны 400 нм. Время воздействия на область вульвы – 3 минуты, в области влагалища – 6 минут.
Эффективность ФТД оценивали с помощью флуоресцентной диагностики. Для анализа накопления фотосенсибилизатора Аласенс в биоткани использовали лазерную электронно-спектральную установку ЛЭСА-01-«БИОСПЕК», состоящую из источника лазерного излучения (диодный лазер 405 нм), лазерно-электронного спектро-анализатора (ЛЭСА), оптоволоконной системы доставки и приема излучения и ноутбука с программным обеспечением UnoMomento. Возбуждение флуоресценции обеспечивается диодным лазером с длиной волны 405 нм и мощностью 30 мВт, проникающим не более чем на 1 мм.
В ходе исследования была получена кривая зависимости индекса флуоресценции и концентрации фотосенсибилизатора. Определение накопления ПП-IХ в пораженных тканях влагалища и вульвы показало, что его уровень пришел в норму только после 4-го сеанса ФДТ. Таким образом, для достижения эффекта в лечении ВВК наиболее оптимальны 4 сеанса ФДТ с Аласенсом (рис. 2).
Период наблюдения за пациентками исчислялся двумя годами. По предварительным данным, эффективность ФДТ с препаратом Аласенс превысила 70%, частота рецидивов снизилась на 60%. На фоне ФДТ зуд и ощущение дискомфорта купировались уже после 1-го сеанса. Еще одно преимущество использования ФДТ при вагинальном кандидозе – отсутствие резистентности возбудителей.
Фотодинамическая терапия с препаратом Фотосенс аппликационно для лечения псориаза (легких и средних форм) и акне
В исследовании эффективности лечения легких и средних форм псориаза с помощью ФДТ, представленном Ольгой Владимировной ДИМИТРИАДИ (к.м.н., старший научный сотрудник Международного научного и клинического центра (МНКЦ) «Интермедбиофизхим», ассистент кафедры дерматологии и микологии Российского университета дружбы народов (РУДН)), в качестве фотосенсибилизатора был выбран 0,2%-ный водный раствор препарата Фотосенс (гидроксиалюминия трисульфофталоцианин), выпускаемого ГНЦ «НИОПИК». В качестве источника излучения использовали светодиодное видеофлуоресцентное устройство для проведения ФД и ФДТ УФФ-675-01-«БИОСПЕК». Эффективность терапии оценивали на основании динамики уровня индекса PASI (Psoriasis Area and Severity Index, индекс распространенности и тяжести псориаза), общего и биохимического анализов крови и мочи, иммунологических показателей (уровень фактора некроза опухоли альфа, интерлейкина 8, малонового диальдегида и проч.), а также данных экспрессии белка Ki-67, трансэпидермальной потери влаги, уровня эритемы, пигментации, флуоресценции.
Основную группу составили 90 больных (60 мужчин и 30 женщин) с обыкновенным и экссудативным псориазом легкой и среднетяжелой формы, получавших ФДТ. В группу сравнения вошли 80 больных (55 мужчин и 25 женщин) с обыкновенным и экссудативным псориазом легкой и среднетяжелой степени, получавших медикаментозную терапию. При анализе данных исследования были определены 2 подгруппы: в 1-ю подгруппу вошли 70 пациентов из основной группы и 62 пациента из группы сравнения с легким течением заболевания (PASI < 10), во 2-ю подгруппу – 20 пациентов из основной группы и 18 пациентов из группы сравнения со среднетяжелым течением заболевания (PASI от 10 до 30).
Пациентам проводилась ФДТ с аппликационным нанесением препарата Фотосенс в виде мази. Время экспозиции составляло 1 час. Плотность мощности облучения – 40 мВт/см², время облучения – 5–15 минут на одно поле (5 см²). Курс лечения включал 5–30 процедур. Процедуры проводились пятидневными курсами с последующим двухдневным перерывом. Анализ результатов исследования показал, что в основной группе 1-й подгруппы после лечения ФДТ клиническая ремиссия была достигнута в 76% случаев, а в группе сравнения 1-й подгруппы после медикаментозной терапии – в 58% случаев. В основной группе 1-й подгруппы отмечалось статистически значимое (р < 0,001) увеличение длительности ремиссии и снижение частоты обострений заболевания в год (рис. 3), а также статистически значимое (р < 0,001) уменьшение медианы индекса PASI.
Анализ результатов исследования в основной группе 2-й подгруппы показал, что клиническая ремиссия после ФДТ была достигнута в 70% случаев, длительность периода ремиссии оказалась более продолжительной (р < 0,05), а частота обострений в год – более низкой после терапии ФДТ (р < 0,01) (рис. 4).
После курса ФДТ средняя величина уровня эритемы в основной группе больных псориазом составила 3,1 балла (р < 0,001), что свидетельствовало о процессах восстановления кожного покрова после лечения. Средняя величина уровня гидратации кожи после курса ФДТ достигла 87,1 балла, что говорило о восстановлении целостности кожного барьера и нормализации уровня гидратации эпидермиса. Кроме того, отмечалась нормализация уровня трансэпидермальной потери влаги (р < 0,001). Во время курса ФДТ у 2 пациентов с псориазом отмечен кратковременный зуд, у 6 – незначительный отек, у всех пациентов наблюдалась остаточная гипер- и гипопигментация, которая не требовала коррекции и исчезала у большинства больных спустя 3–6 месяцев. На основании данных исследования авторы сделали вывод, что ФДТ с препаратом Фотосенс является эффективным методом лечения больных псориазом легкой и средней степени тяжести. При аппликационном применении мази, содержащей водный раствор Фотосенса, не отмечалось побочных эффектов и фототоксических реакций.
Анализ результатов пятилетнего наблюдения пациентов с псориазом выявил следующие тенденции:
- среднее значение индекса PASI до лечения составляло 17,3 ЕД, при последующих обострениях – 10,9 ЕД;
- средняя длительность периода ремиссии до проведения ФДТ достигала 9,3 месяца, после – 14,8 месяца;
- среднее значение частоты обострения заболевания до лечения – 1,5, после курса ФДТ – 0,9.
Ни у одного пациента не было выявлено признаков развития резистентности к проводимой терапии при последующих курсах, а также нарастания тяжести течения заболевания и сокращения длительности ремиссии.
О.В. Димитриади рассказала об опыте применения ФДТ с препаратом Фотосенс в терапии акне, полученном специалистами кафедры дерматологии и клинической микологии РУДН. В исследовании участвовали 22 пациента в возрасте от 18 до 28 лет, которые были разделены на три группы в зависимости от тяжести заболевания. В 1-ю группу вошли 15 больных с легким течением акне, во 2-ю – 2 пациента со среднетяжелым течением, в 3-ю – 5 больных с тяжелым течением. Цель исследования – оценить антипролиферативный, антибактериальный и противовоспалительный эффекты ФДТ при лечении акне. Для контроля результатов лечения помимо оценки клинической картины использовали показатели общего и биохимического анализов крови и мочи, уровня малонового диальдегида, интегральный показатель общего антиоксидантного статуса, данные гистологических изменений, иммунологических исследований и проч. Пациентам проводилась ФДТ с аппликационным нанесением 0,2%-ного водного раствора препарата Фотосенс. Время экспозиции составляло 1 час. Плотность мощности облучения – 40 мВт/см², время облучения – 5–15 минут на одно поле (5 см²). Курс лечения состоял из 5–30 процедур. Процедуры проводились пятидневными курсами с последующим двухдневным перерывом или пятидневными курсами с недельным перерывом. После лечения в 1-й группе (n = 15) клиническая ремиссия была достигнута в 80% случаев (12 пациентов), во 2-й группе (n = 2) значительного улучшения удалось добиться в 100% случаев, в 3-й группе (n = 5) клиническая ремиссия была достигнута в 60% случаев (3 пациента), значительное улучшение – в 40% (2 пациента).
Длительность периода ремиссии у пациентов, получавших ФДТ с препаратом Фотосенс, достоверно (р < 0,001) увеличилась в среднем до 2,2 месяца. Распространенность патологического процесса при последующих обострениях снизилась у всех пациентов в среднем на 30%. Результаты лабораторных и функциональных исследований пока находятся в стадии обработки. Однако уже сейчас можно утверждать, что ФДТ акне с препаратом Фотосенс является перспективным методом лечения, практически не сопровождается побочными эффектами и не приводит к нарастанию тяжести течения заболевания при последующих обострениях.
Фотодинамическая терапия с препаратом Аласенс для лечения неонкологических заболеваний (акне, кератомы, розацеа и др.)
По мнению к.м.н., доцента кафедры дерматовенерологии Национального исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова, главного врача МНКЦ «Интермедбиофизхим» Сергея Николаевича АХТЯМОВА, интерес специалистов к ФДТ объясняется ее преимуществами, а именно:
- малой инвазивностью метода;
- наличием ряда онкологических и неонкологических заболеваний кожи, поддающихся ФДТ;
- возможностью применения в ФДТ доступных излучателей – лазеров, источников импульсного света, флуоресцентных ламп, диодных источников, слайдопроекторов;
- способностью воздействовать на большие по площади участки тела;
- использованием видимого спектра излучения, проникающего глубоко в кожу, что позволяет при наличии в ней фотосенсибилизатора оказывать фотодинамический эффект на патологические клетки.
Наиболее востребованным фотосенсибилизатором считается Аласенс (5-АЛК). Это объясняется тем, что профотосенсибилизатор 5-АЛК – метаболический предшественник ПП-IХ – обладает мощным фотосенсибилизирующим эффектом. Относительно низкий молекулярный вес 5-АЛК позволяет применять препарат местно, в виде крема или раствора, и тем самым решать проблему системной фотосенсибилизации. 5-АЛК способна селективно накапливаться в метаболически гиперактивных и быстро делящихся кератиноцитах, 5-АЛК быстро конвертируется в ПП-IХ в гиперсекреторных меланоцитах и пролиферирующих фибробластах. Установлено, что ПП-IХ, образовавшийся в результате конверсии 5-АЛК, имеет тропность к сально-волосяным фолликулам.
«Наша группа в течение 5–6 лет активно участвовала в программе московского правительства по исследованию эффективности фотодинамики в разных областях медицины, в том числе в дерматологии. Мы изучали эффективность ФДТ при таких неонкологических заболеваниях кожи, как акне, розацеа, кератоз, псориаз, а также базальноклеточный рак (БКР). В общей сложности под нашим наблюдением находилось свыше 160 человек, которым проводились стандартные клинические или лабораторные исследования», – пояснил докладчик. Флуоресцентная диагностика осуществлялась электронным спектроанализатором ЛЭСА-01-«БИОСПЕК», что позволяло отслеживать динамику накопления в высыпаниях 5-АЛК и ПП-IХ. На обработанные участки на 3–14 часов наносили раствор или 20%-ную мазь Аласенс в виде аппликаций. Облучение проводили светодиодным видеофлуоресцентным устройством, способным испускать импульсный свет в синем диапазоне спектра для диагностики заболевания (длина волны 400 ± 10 нм) и в красном диапазоне спектра (длина волны 630 ± 10 нм) мощностью до 120 мВт/см² – для терапии. Анализ результатов лечения больных акне (n = 40) показал высокую эффективность ФДТ с препаратом Аласенс: существенное улучшение отмечалось у 90% пациентов с легким течением заболевания и у 72% – со среднетяжелым, в то время как в группе пациентов, которым назначалась ФДТ без фотосенсибилизатора, улучшение отмечалось только у пациентов с высоким содержанием эндогенных порфиринов на коже. Побочные эффекты носили транзиторный характер, отмечались главным образом у пациентов, получавших ФДТ с 5-АЛК, и включали воспалительный фолликулит, эритему, образование корок.
Метод ФДТ с аппликацией препарата Аласенс продемонстрировал также высокую эффективность у больных розацеа (n = 30): существенное улучшение отмечалось у 80% пациентов с эритематозно-телеангиэктатической стадией и у 65% с папуло-пустулезной.
«Особый интерес для нас представляла эффективность ФДТ при кератозах. Не секрет, что порядка 50% пациентов, обращающихся к нам за помощью, – пожилые люди с себорейными и актиническими кератозами. При себорейных кератозах ФДТ не показала того эффекта, на который мы рассчитывали. В то же время ФДТ с препаратом Аласенс оказалась самым эффективным из всех известных методов, применяемых в лечении актинических кератозов – наиболее частых предраковых дерматозов. Эффект от ФДТ с Аласенсом достигался у 90% больных уже после одной процедуры», – констатировал С.Н. Ахтямов.
Метод ФДТ с Аласенсом продемонстрировал высокую терапевтическую эффективность при лечении пациентов с БКР (n = 23), особенно с поверхностной формой: полная клиническая ремиссия достигалась у 86% пациентов с поверхностной формой БКР после одной процедуры.
При узловой форме БКР показано комбинированное лечение – хирургическое иссечение базалиом с последующим проведением ФДТ с просенсибилизатором, чтобы исключить возможность рецидивов. Длительная ремиссия (более 5 лет) отмечалась у всех пациентов с узловой формой БКР после проведенного комбинированного лечения. Полученные данные позволяют сделать следующие выводы:
- ФДТ с Аласенсом эффективна у пациентов с акне, розацеа, при которых метод можно использовать в качестве монотерапии и в комбинации с традиционными методами лечения;
- наиболее впечатляющие терапевтические и косметические результаты ФДТ с Аласенсом наблюдаются при пограничных высыпаниях – актинических кератозах, а также поверхностных формах БКР;
- во время и после проведения ФДТ системные побочные эффекты не развиваются. Негативные реакции кожи носят транзиторный характер и легко устраняются.
Опыт применения флуоресцентной диагностики с препаратом Аласенс в онкодерматологии
Как отметила в начале своего выступления Антонина Николаевна УРЛОВА (хи-рургическое отделение онкологической ортопедии Московского научно-исследовательского онкологического института (МНИОИ) им. П.А. Герцена), опухоли кожного покрова представляют одну из распространенных групп новообразований. Согласно последним данным, у российских женщин они занимают 2-е место в структуре заболеваемости (13,7%, с меланомой – 15,6%) после рака молочной железы (20,1%), у мужчин – 3-е место (9,8%, с меланомой – 11,1%) после опухолей легких (19,9%) и желудка (9,8%). Большая частота рецидивов, увеличение числа первично-множественных форм ставят это заболевание в ряд важнейших. Особенно остро стоит вопрос дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей3.
В МНИОИ им. П.А. Герцена было проведено исследование, целью которого стало повышение эффективности диагностики злокачественных опухолей кожи путем использования флуоресцентных методов.
Исследование предусматривало:
- разработку комплексного метода ФД с препаратом Аласенс у больных раком кожи различной локализации, включающего визуальную оценку флуоресценции и последующую ЛФС; изучение методом ЛФС распределения 5-АЛК-индуцированного ПП-IХ после приема препарата Аласенс и определение дискриминационных значений спектрально-флуоресцентных диагностических параметров, характеризующих очаги рака кожи и доброкачественных опухолей кожи;
- оценку эффективности разработанного флуоресцентного метода диагностики злокачественных опухолей кожи с определением его чувствительности, специфичности и диагностической точности;
- определение характера и частоты побочных эффектов и осложнений при использовании разработанной методики.
В исследовании приняли участие 237 больных (преимущественно женщины) в возрасте 50–70 лет с различными множественными раковыми поражениями кожи лица и туловища (551 очаг). Пациенты были разделены на две группы: группу ФДТ составили 222 пациента с раком кожи I–II степени (T1-3N0M0) с последующей фотодинамической терапией, в группу хирургического лечения вошли 15 больных раком кожи III–IV степени (Т3-4N0M0) с последующим хирургическим иссечением новообразований. Подавляющее большинство пациентов имели единственный очаг опухолевого поражения с локализацией в области головы или шеи. Всем больным проводилась флуоресцентная диагностика с препаратом Аласенс с использованием лазерной электронно-спектральной установки ЛЭСА-01-«БИОСПЕК», светодиодного флуоресцентного устройства для проведения диагностики и фотодинамической терапии. Как известно, в опухолевых клетках снижена активность фермента феррохелатазы, который переводит ПП-IХ в гем (комплексное соединение порфиринов с двухвалентным железом). 5-АЛК представляет собой промежуточный продукт синтеза гема. Таким образом, при повышенной концентрации этой кислоты в опухолевых клетках повышается концентрация ПП-IХ. Методика протопорфиринового проведения флуоресцентной диагностики с препаратом Аласенс заключалась в следующем. Сначала пациентов полностью осматривали под белым светом и выявляли очаги поражения кожи. Затем больным перорально назначали препарат Аласенс в дозе 30 мг/кг за три часа до ФД. Через три часа осматривали кожные покровы пациентов в синем свете. При наличии информации об анамнезе опухолевых поражений кожи сначала оценивали границы опухолевых очагов, затем искали дополнительные очаги флуоресценции. При их обнаружении проводили цитологическую диагностику. В большинстве случаев границы новообразований совпадали с границами флуоресценции и лишь в 25% случаев были шире, что в дальнейшем повлияло на объем проводимого лечения.
Метод ФД с препаратом Аласенс показал 100%-ную чувствительность. Его специфичность составила 61,5%, а диагностическая точность – 78,9%. Данные ФД были сопоставимы с результатами морфологического исследования. Результаты исследования продемонстрировали высокую диагностическую эффективность метода: проведение ФД позволило уточнить границы опухолей кожи у 100% больных и выявить скрытые очаги первично-множественного рака кожи у 27% больных.
Заключение
Флуоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия с просенсибилизатором Аласенс и фотосенсибилизатором Фотосенс считаются инновационными методами профилактики, диагностики и лечения дерматологических, гинекологических заболеваний, а также онкодерматозов. В ходе ряда исследований была выявлена высокая эффективность ФД и ФДТ с Аласенсом и Фотосенсом в диагностике и лечении остроконечных кондилом, вульвовагинального кандидоза (> 70%), легких и среднетяжелых форм псориаза (76 и 70%) и акне (90 и 76%), а также розацеа (80%), актинических кератозов (90%), поверхностных форм БКР (86%). Подтвержден благоприятный профиль безопасности ФД и ФДТ с Аласенсом и Фотосенсом: отсутствовали системные побочные эффекты, редкие негативные реакции кожи носили транзиторный характер и легко поддавались устранению.