Применение Виферона в комплексном лечении урогенитальных инфекций у беременных с целью профилактики внутриутробных инфекций у новорожденных
- Аннотация
- Статья
- Ссылки
Реализация внутриутробной инфекции у новорожденного во многом зависит от его иммунитета (2, 4, 11, 17), на состояние которого существенно влияет состояние здоровья матери. Наличие инфекционно-воспалительных заболеваний урогенитального тракта у женщин во время беременности способствует длительной внутриутробной антигенной стимуляции иммунной системы плода и приводит к нарушению формирования адекватного иммунного ответа новорожденного (1, 10).
Особенности этиологии инфекционно-воспалительных заболеваний урогенитального тракта во время беременности, нарушения функционирования системы интерферона у этого контингента беременных, корреляция измененных параметров ифс с рядом акушерских и перинатальных осложнений являются показанием для проведения интерферон-корригирующей терапии в комплексе лечения уги в третьем триместре беременности. С этой целью в акушерстве с успехом используется препарат виферон® (6, 12, 13).
Цель данного исследования – оценка эффективности виферонотерапии в комплексе лечения смешанных уги во время беременности на становление иммунитета в онтогенезе и течение периода ранней адаптации у новорожденных.
Пациенты и методы
Нами проведен анализ особенностей анамнеза, течения беременности и родов у женщин с уги, а также клиническое и иммунологическое обследование их новорожденных. Основную группу составили 166 беременных, которые в комплексе терапии уги во время беременности наряду с этиотропной противомикробной и противовирусной терапией, коррекцией нарушений иммунного статуса, восстановлением колонизационной резистентности получали виферон® с 28-й недели гестации, и их новорожденные. Группу сравнения составили 80 беременных без интерферонокоррекции и их новорожденные.
Всем новорожденным наряду с анализом клинического течения раннего неонатального периода было проведено иммунологическое обследование, включающее определение фенотипической характеристики лимфоцитов, уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови, фагоцитарной функции нейтрофилов, интерферонового и цитокинового статуса.
Иммунофенотипирование популяций и субпопуляций лимфоцитов проводили методом проточной цитофлюорометрии (facscan фирмы becton dickinson) двойным окрашиванием (fitc и pe) после их специфического связывания моноклональными антителами отечественного производства («медбиоспектр» и «сорбент», россия) к основным дифференцировочным (cd3, cd4, cd8, cd16, cd20) и активационным (cd25, cd38, hladr) маркерам. Уровень иммуноглобулинов 3 основных классов (igg, iga, igm) определяли с использованием моноспецифических сывороток (нии эпидемиологии и микробиологии им. Н.ф. гамалеи рамн, россия) методом радиальной иммунодиффузии в агаре по manchini. Фагоцитарную активность нейтрофилов определяли по их поглотительной способности убитой взвеси staph. Aureus lepin (государственный институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.а. тарасевича, россия).
Исследование ифс проводили методом, предложенным с.с. григорян и ф.и. ершовым с определением сывороточного ифн в цельной крови, способности лейкоцитов к продукции α-ифн индукцией вирусом болезни ньюкасла (нии вирусологии им. Д.и. ивановского рамн, россия), способности лимфоцитов к продукции g-ифн индукцией стафилококковым энтеротоксином а (нии эпидемиологии и микробиологии им. Н.ф. гамалеи рамн).
Исследование концентраций цитокинов (пкг/мл) проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа в системе бидетерминантного определения антигена (elisa) с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента (5) в стимулированных культурах клеток крови новорожденных.
Результаты и их обсуждение
При сравнительной оценке этиологии уги (таблица 1) у матерей 2 групп было установлено, что чаще виферон® использовался при лечении герпесвирусных инфекций: цмви и впг-2 инфекции.
Обратная закономерность применения виферона была выявлена при терапии неспецифических уги бактериальной этиологии. Стадия инфекционного урогенитального процесса (таблица 2) не оказывала влияния на частоту использования виферона во время беременности.
Уги, диагностированную во 2-м триместре беременности, чаще лечили с использованием виферона; при постановке диагноза уги в 3-м триместре беременности виферон® применялся реже, что, по-видимому, было обусловлено поступлением беременной в стационар уже для родоразрешения (таблица 3).
По течению настоящей беременности (таблица 4) сравниваемые группы статистически не отличались, лишь многоводие, являющееся одним из антенатальных диагностических критериев вуи, чаще выявлялось у беременных без интерферонокоррекции. Оценка состояния плода к моменту родоразрешения достоверно чаще свидетельствовала о его удовлетворительном состоянии у беременных с интерферонокоррекцией.
Роды (таблица 5) у матерей основной группы протекали с меньшим числом осложнений, чем в группе без применения виферона.
При исследовании состояния иммунитета у новорожденных в первые сутки жизни, после виферонотерапии матери (таблица 6), отмечалась тенденция к нормализации количества лимфоцитов, повышались уровни зрелых т-лимфоцитов, т-хелперов и клеток-продуцентов ил-2, и они были выше, чем в группе контроля.
При одинаковом уровне сд8 в обеих обследованных группах увеличение числа т-хелперов приводило к повышению иммунорегуляторного индекса.
Несмотря на лечение вифероном матерей, сохранялось высоким количество ранних предшественников т-и в-лимфоцитов, клеток, экспрессирующих рецепторы к ил-2, свидетельствующих о сохраняющейся активации клеточного иммунитета ребенка к моменту рождения (4).
Интерферонокоррекция у матери приводила к нормализации экспрессии hladr антигена мононуклеарными клетками крови новорожденных, обеспечивающих презентацию антигена т-хелперам и контакт с клетками-мишенями. Сравнительный анализ субпопуляций лимфоцитов с фенотипом цитотоксичности показал, что на фоне терапии вифероном во время беременности происходила нормализация уровней ек и клеток с фенотипом cd16 + cd8 +, а также отмечалась тенденция к увеличению фракции клеток с фенотипом активированных цитотоксических лимфоцитов (cd8 + dr +).
В гуморальном звене иммунитета (таблица 7) сохранялось низким число дифференцированных в-лимфоцитов, обусловленное, по-видимому, повышенным апоптозом их незрелых предшественников на фоне высоких доз антигена при внутриутробном инфицировании (4, 11, 17). Отмечалось увеличение уровня igg за счет его транс-плацентарного переноса из крови матери и снижение уровней iga и igm (0,06 г/л и 0,2 г/л, соответственно), хотя их значения и превышали показатели контрольной группы.
При оценке антимикробного потенциала клеток (таблица 8) новорожденных после виферонотерапии матери отмечалось уменьшение дефицита нейтрофилов и некоторое повышение фагоцитарного индекса, однако их значения оставались достоверно ниже аналогичных показателей контрольной группы.
Не было выявлено влияния интерферонокоррекции у матери на процент незрелых нейтрофилов, которые оставались значительно выше показателей группы контроля.
При оценке ифс (таблица 9) у новорожденных, матерей которых лечили вифероном, было отмечено повышение способности лимфоцитов к продукции γ-ифн почти в 2 раза по сравнению с детьми, чьи матери не получали виферон® во время беременности.
Способность лейкоцитов к продукции α-ифн на фоне лечения матери снижалась и приближалась к таковой у новорожденных контрольной группы. Уровни сывороточного ифн у новорожденных всех обследованных групп достоверно не отличались.
При анализе продукции медиаторов иммунного ответа (таблица 10) было установлено, что виферонотерапия матери приводила к повышению стимулированной продукции цитокинов с провоспалительной направленностью и уменьшению индуцированной продукции ил-4 у новорожденных.
Оценка состояния про- и противовоспалительных цитокинов на основании индуцированной продукции γ-ифн и ил-4 позволила выявить их разнонаправленную динамику у детей на фоне использования виферона в комплексе терапии уги у матерей с сохранением баланса про- и противовоспалительных цитокинов к моменту рождения.
Таким образом, лечение вифероном в комплексной терапии дородовой подготовки беременных с инфекционно-воспалительными заболеваниями урогенитального тракта способствовало антенатальной иммунокоррекции у плода, проявлявшейся повышением стимулированной продукции лимфоцитами g-ифн, увеличением числа зрелых т-лимфоцитов, т-хелперов, клеток-продуцентов ил-2, что характеризовало нормализацию иммунорегуляторных механизмов th1 иммунного ответа.
Кроме того, лечение вифероном беременных снижало антигенную стимуляцию иммунитета у плода, что приводило к снижению количества ек, клеток с фенотипом cd16 + cd8 +, а также уровней iga и igm, которые, однако, оставались повышенными. Нормализовалась экспрессия hladr антигена мононуклеарными клетками крови новорожденных, обеспечивающих презентацию антигена т-хелперам и контакт с клетками-мишенями.
Виферонотерапия матери способствовала увеличению стимулированной продукции иммуноцитокинов с провоспалительной направленностью и уменьшению индуцированной продукции ил-4.
Положительный клинический эффект антенатальной иммунокоррекции вифероном характеризовался снижением частоты инфекционных осложнений у новорожденных в 1,5 раза, как за счет тяжелых форм (с 20% до 12%), так и за счет локальных инфекционных процессов (с 17,5% до 9%), а также патологии неинфекционного характера – асфиксии при рождении с 23,75% до 12,65%, гипоксически-ишемических поражений цнс с 47,5% до 21%, звур с 22,5% до 13,25%, морфо-функциональной незрелости 18,75% до 12% (таблица 11).
В целом после виферонотерапии матерей во время беременности отмечено статистически значимое улучшение состояния здоровья их новорожденных (количество здоровых детей увеличилось с 35% до 68,7%).
Заключение
Таким образом, клинико-иммунологическая эффективность виферона в комплексной терапии уги у матерей во время беременности выражалась в снижении антигенной нагрузки и антенатальной иммунокоррекции у их новорожденных, что приводило к снижению частоты патологических состояний у новорожденных в раннем неонатальном периоде.
Положительный клинико-иммунологический эффект антенатальной иммунокоррекции вифероном необходимо учитывать как при разработке критериев прогноза реализации внутриутробной инфекции в раннем неонатальном периоде, так и при определении показаний к проведению иммунокорригирующей терапии у новорожденных.