Нарушения показателей местного и системного иммунитета у детей с атопическим дерматитом

Таблица 1. Распределение детей по нозологической форме АтД и поло-возрастным характеристикам

Таблица 2. Содержание цитокинов при АтД в зависимости от степени тяжести заболевания в период обострения

Таблица 3. Показатели иммуноглобулинов у детей

Таблица 4. Показатели неспецифических факторов защиты у детей

Таблица 5. Показатели субпопуляций лимфоцитов у детей

Введение

Последние десятилетия отмечается неуклонный рост аллергических заболеваний. Данной патологией страдает около 30–40% населения земного шара. Особую озабоченность вызывают рост аллергизации среди детского населения и развитие тяжелых и нетипичных форм заболевания, торпидных к традиционным методам лечения. Доля детей с атопическим дерматитом (АтД) достигает 12–16% [1–3]. Согласно отечественным официальным статистическим данным, частота впервые диагностированного АтД составляет 240–250 случаев на 100 тыс. обследованного населения [4–6].

Основная причина запуска аллергического воспаления при АтД – нарушение баланса Т-хелперов первого и второго типов (Th1/Th2) в иммунном ответе [2].

Исходя из современных представлений, в патогенезе АтД важное место занимают показатели клеточного звена иммунитета – Т-клетки с хелперной активностью, продуцирующие цитокины разнонаправленного действия [7]. Роль цитокинов в регуляции иммунного ответа при АтД крайне велика. Дисбаланс в иммунной системе обусловлен изменениями в системе цитокинов [8–11].

Цель данного исследования – проанализировать характер нарушения местного иммунитета кожи и определить роль интерлейкинов (ИЛ) 1-бета, 6, 8, фактора некроза опухоли (ФНО) альфа, интерферона (ИФН) гамма в формировании клинических форм АтД у детей.

Материал и методы

Наблюдение за больными АтД проводилось в 2016–2019 гг. на базе отделения пульмонологии и аллергологии Республиканской детской клинической больницы Республики Северная Осетия – Алания в г. Владикавказе. Под наблюдением находилось 105 детей (55 мальчиков и 50 девочек) с АтД в возрасте от шести месяцев до 14 лет. Все пациенты были разделены на две группы: с IgE-ассоциированным АтД (n = 64)и не IgE-ассоциированным АтД (n = 41). Распределение обследованных больных по нозологической форме и поло-возрастным характеристикам представлено в табл. 1.

Основная часть

Диагноз АтД поставлен на основании клинических проявлений в соответствии с диагностическими критериями, предложенными J.М. Hanifin и К.D. Cooper в 1986 г. Поскольку объективизация оценки тяжести АтД весьма затруднительна, пришлось прибегнуть к балльной шкале степени тяжести SCORAD (Scoring Atopic Dermatitis), предложенной Европейской рабочей группой по АтД в 1994 г. Степень тяжести определялась в период обострения и на момент поступления в стационар. Состояние детей, степень тяжести и распространенность АтД оценивали на основании российского согласительного документа по АтД «Атопический дерматит: рекомендации для практических врачей» (2002 г.).

Обследованные больные АтД были разделены на три группы в зависимости от степени тяжести заболевания. У 38 (35%) пациентов имела место легкая степень (одно-два обострения в год, продолжительность ремиссии 6–8 месяцев), у 55 (54%) детей – среднетяжелая (частота обострений три-четыре раза в год, длительность ремиссии два-три месяца), 12 (11%) больных – тяжелая (не менее пяти обострений в течение последнего года при непродолжительной ремиссии один-два месяца или персистирующее течение заболевания). В зависимости от площади поражения кожных покровов (16,68%) детей разделили на подгруппы с распространенным АтД (53 (49,0%) случая) и диффузным (37 (34,32%) случаев). Контрольную группу составили 20 практически здоровых детей.

Уровни цитокинов (ИЛ-1-бета, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-альфа, ИФН-гамма) определяли с помощью иммуноферментного анализа (тест-система фирмы «Вектор-Бест»,  аппарат «Олимпус» компании «Текан»). Статистическую обработку количественных данных проводили на персональном компьютере с использованием статистических формул программы Microsoft Office Excel. Была рассчитана средняя арифметическая М ± m, определена достоверность различий средних значений и коэффициента корреляции по критерию Стьюдента.

Уровни цитокинов в период обострения у детей с IgE-ассоциированным и нe IgE-ассоциированным АтД достоверно не различались. Такие данные указывают на преобладание Тh2-типа иммунного ответа и предполагают аналогичные механизмы патогенеза в этих группах детей с АтД, несмотря на различные пусковые механизмы развития заболевания (табл. 2).

При исследовании цитокинов сыворотки у больных АтД, находящихся в периоде обострения, установлено, что уровень продукции ИФН-гамма был достоверно снижен у детей с тяжелым и среднетяжелым течением – 1,24 ± 0,32 и 1,32 ± 0,21 пг/мл соответственно по сравнению с легким течением (11,1 ± 1,12 пг/мл) (р < 0,05). При тяжелом (27,3 ± 4,51 пг/мл) и среднетяжелом течении (13,41 ± 9,0 пг/мл) АтД уровень ИЛ-1-бета был выше, чем при легком течении (р < 0,05). У пациентов с выраженным обострением при тяжелом течении (оценка по SCORAD более 40 баллов) уровень ИЛ-6 составил 192,5 ± 22,4 пг/мл, при среднетяжелом – 163,03 ± 22,6 пг/мл. Следовательно, достоверных различий между этими группами нет. Показатели ИЛ-6 сыворотки при тяжелом и среднетяжелом течении АтД существенно превышали таковые  (р < 0,05) при легком течении (28,45 ± 2,25 пг/мл).

Аналогичные результаты мы получили при анализе уровня ИЛ-8 у пациентов в периоде обострения. При среднетяжелом, тяжелом и легком течении показатели ИЛ-8 составили 195,7 ± 19,4, 184,0 ± 21,33 и 37,2 ± 3,4 пг/мл соответственно. Были определены высокие концентрации ФНО-альфа в крови у больных с тяжелым (48,6 ± 11,4 пг/мл) и среднетяжелым течением (46,1 ± 4,01 пг/мл). Достоверных различий в уровне ФНО-альфа у пациентов с тяжелым и среднетяжелым течением заболевания не выявлено. При легком течении заболевания уровень ФНО-альфа составил 13,32 ± 1,34 пг/мл. Это достоверно ниже показателей при тяжелом и среднетяжелом течении заболевания.

При оценке показателей иммуноглобулинов (Ig) А, М и G установлено достоверное снижение показателей IgА и IgG: 0,42 ± 0,05 против 1,94 ± 0,02 (p > 0,05) и 5,6 ± 0,28 против 12,0 ± 0,2. Достоверной разницы между показателями у детей с легкой и среднетяжелой степенью тяжести не зарегистрировано. Отмечалась лишь достоверная разница с показателями контрольной группы. Уровень IgЕ достоверно выше у детей с тяжелой и среднетяжелой формой. У детей с легкой формой наблюдалась лишь тенденция к повышению показателя. IgМ в группе больных детей не менялся (табл. 3).

В ходе исследования проанализировано состояние неспецифической резистентности организма. Изучение системы фагоцитоза предполагало определение фагоцитарного числа, фагоцитарного индекса и активности лизоцима. На основании оценки результатов данного процесса было выявлено снижение показателей фагоцитарного индекса и активности лизоцима у детей со среднетяжелой и тяжелой формой заболевания. У таких пациентов также наблюдалось достоверное снижение уровня активности лизоцима. При легкой форме достоверной разницы не выявлено. Уровни циркулирующих иммунных комплексов были достоверно повышены у детей с тяжелой формой АтД (табл. 4).

Результаты исследования субпопуляций лимфоцитов показали снижение процентного содержания CD3-, CD4-, CD8-лимфоцитов у детей c тяжелой формой (табл. 5).

Таким образом, уровень выделения провоспалительных цитокинов напрямую зависел от распространенности и степени тяжести процесса при АтД. Наибольшие концентрации отмечались при тяжелом и среднетяжелом течении заболевания, а также при распространенном и диффузном поражении кожи. При легкой форме заболевания уровень цитокинов достоверно отличался от уровня цитокинов при тяжелом и среднетяжелом течении заболевания. Уровень ИФН-гамма также был напрямую связан со степенью тяжести. Наименьшие концентрации отмечались при легком течении заболевания.

Обсуждение

В исследовании отмечалось достоверное снижение показателей CD3-, CD4-, CD8-лимфоцитов у детей с тяжелой формой заболевания, а также уменьшение показателей IgА и IgG и угнетение активности лизоцима. При легкой форме уровни цитокинов достоверно отличались от таковых при тяжелом и среднетяжелом течении. Уровень ИФН-гамма в большей степени зависел от степени тяжести состояния. Наиболее низкое его содержание зафиксировано у детей с легкой формой. Установлено, что показатели IgЕ повышаются во время обострения атопии.

Заключение

Полученные данные свидетельствуют о значительных нарушениях в системе местного и системного иммунитета, что требует коррекции нарушений и включения в комплексную терапию иммуномодулирующих препаратов. Это позволит снизить риск развития тяже-лых форм заболевания и обострений.